Il film è incentrato su Viridiana (Silvia Pinal), una giovane novizia in procinto di prendere i voti, mandata dalla Madre Superiora a visitare suo zio Don Jaime (Fernando Rey), ultimo parente rimastole. Dopo un periodo nella sua villa in campagna, Don Jaime, convinto che la giovane assomigli alla moglie morta anni prima, tenta di sedurla. Viridiana tenta di fuggire ma Jaime la costringe a rimanere con l'aiuto della serva Ramona, che le somministra un narcotico. Jaime prende in considerazione l'idea di violentarla nel sonno, ma poi decide altrimenti. Il mattino seguente comunica però a Viridiana di averla violentata, utilizzando l'argomentazione della verginità perduta per convincerla a rimanere. Don Jaime ottiene però la reazione opposta e Viridiana, disgustata, abbandona la tenuta diretta al convento. Poco dopo, le autorità la fermano per comunicarle che lo zio si è impiccato.

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